醫(yī)學晉升職稱論文(2)
醫(yī)學晉升職稱論文篇二
細胞毒素相關蛋白與幽門螺桿菌致病的相關性研究
【關鍵詞】 糖尿病
【摘要】 目的 通過光學顯微鏡檢查，研究糖尿病甲襞微循環(huán)早期病理改變。方法 采用國產醫(yī)用光學儀器廠生產的WX-753型顯微鏡，檢查部位，左手環(huán)指，甲襞皮膚滴1～2滴香柏油，滑潤指甲提高透明度放大倍數為80倍觀察顯微鏡的形態(tài)、動態(tài)指標。結果 73例(男45例，女28例)年齡24～61歲之間的糖尿病患者，Ⅰ期與Ⅱ期差異無顯著性，符合早期網膜視病理改變。結論 糖尿病在Ⅲ、Ⅳ期視網膜病變加重，嚴重影響甲襞循環(huán)，甲襞測定反映出視網膜病變進展，為臨床對癥治療提供了指導意義。
【關鍵詞】 糖尿病;視網膜病變;甲襞微循環(huán)
【Abstract】 Objective To study pathological change of microcirculation of nail fold in diabetic through optical microscope.Methods Cedaroil dripped on digitus quartus manus of left hand in order to increase transparency.We observed microcirculation of nail fold through optical microscope (WX-753) whose enlargement factor was 80.Results There were 73 cases (45 males and 28 females) whose ages ranged from 24 to 61 years old.There were no significant difference between grade-1 and grade-2.Conclusion Retinopathy was aggravated and microcirculation of nail fold was effected badly at grade-3 and grade-4 of diabetes.Microcirculation of nail fold was consistent with retinopathy and provided the direction on clinical treatment.
【Key words】 diabetes;retinopathy;microcirculation of nail fold
糖尿病視網膜病(DR)是眼科主要致盲眼病之一，其發(fā)病在國內外皆有明顯升高趨勢[1]。早期診斷是對OR進行有效防治的前提，為了探討OR的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，筆者于1995年3月～1996年3月對73例在內科確診后眼底檢查的DR患者，甲襞微循環(huán)檢查甲襞小動脈和小靜脈之間微循環(huán)改變，以探討其與視網膜病變的關系及意義。
1 資料與方法
1.1 一般資料
DR患者共73例，男45例，女28例，年齡24～61歲，其中2例玻璃體積血眼底窺不進，行眼科B超檢查，瞳孔擴大不理想，用雙星明眼液散瞳檢查。
1.2 方法
采用徐州醫(yī)用光學儀器廠生產的WX-753型顯微鏡，檢查部位，左手環(huán)指，甲襞皮膚滴1～2滴香柏油，滑潤指甲提高透明度放大倍率為80倍。
【關鍵詞】 幽門螺桿菌
【摘要】 目的 研究細胞毒素相關蛋白與幽門螺桿菌(Hp)致病的相關性。方法 調查114例胃鏡受檢者的Hp感染率，應用血清ELISA技術檢測了Hp菌株中細胞毒素相關蛋白(Cag A)陽性數，并對該蛋白與慢性胃病的關系進行了初步分析。結果 54例Hp陽性者中，Cag A陽性25例，陽性率46.3%;胃炎、十二指腸潰瘍和胃癌組織Cag A陽性率分別為27.3%、71.4%和85.7%(P<0.01)。Cag A陽性菌株感染者胃黏膜的炎癥程度、活動度及萎縮、腸化與淋巴濾泡形成數均高于陰性者。結論 證實Cag A在Hp致病中的重要作用。
【關鍵詞】 幽門螺桿菌;細胞毒素相關蛋白;致病性
幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)是人類最常見的一種慢性致病菌，感染了世界上超過50%的成年人，但并非所有的陽性者都有胃部癥狀或病變，Hp的基因多態(tài)性與其致病性的關系目前已受到了普遍的重視，毒素相關蛋白(Cag A)抗原是研究較多的一種。為了更深入地了解該菌的致病機制，本研究調查了我國南方Hp菌株中Cag A陽性數的比例及與胃部疾病的相關性。
1 材料與方法
1.1 病人與取材
1.1.1 病人
本組114例胃鏡受檢者來自我院胃鏡室，男73例，女41例;平均年齡46.3歲(17～67歲)。排除孕婦和受檢前2周內服用抗生素和有胃出血者。
1.1.2 胃鏡檢查與取材
常規(guī)胃鏡檢查，觀察胃十二指腸病變，主要包括紅斑滲出、糜爛、潰瘍和胃癌。從胃竇取材進行Hp檢測。
1.2 Hp檢測每例患者均進行以下試驗
1.2.1 快速尿素酶試驗
應用自制試劑，24h變色者判斷為陽性。
1.2.2 血清ELISA技術
應用自制的超聲粉碎抗原ELISA檢測藥盒，抗原包被濃度為30μg/孔，血清稀釋度為1∶100，陽性限為0.791(492nm OD值)。
1.2.3 細菌分離培養(yǎng)
胃竇取材，Skirrow選擇性培養(yǎng)基37℃微氧培養(yǎng)5天分離Hp菌。
1.2.4 病理染色
胃竇部組織1塊，常規(guī)制作病理切片，Giemsa染色鏡檢，菌量判定標準如下：(+):Hp累及少于5個胃小凹，單個胃小凹中菌量少于10個;(++)：Hp累及少于5個胃小凹，單個小凹中菌量多于10個;(+++)：Hp菌累及多于5個胃小凹。
1.2.5 呼氣試驗(UBT)
采用微劑量(1μCi)14C― UBT檢測試劑盒進行(深圳養(yǎng)和生物科技有限公司)，陽性限為200dpm。
1.2.6 Hp判斷
細菌培養(yǎng)陽性和病理染色中有以上典型形態(tài)細菌者為陽性，培養(yǎng)陰性而病理菌量少于(+)或形態(tài)不典型者需合并UBT、RBT、ELISA任一陽性者判斷為陽性。
1.3 Cag A檢測
應用上海晶瑩生物技術有限公司生產的克隆純化Cag A包被ELISA反應板，按常規(guī)ELISA技術對 Hp陽性患者血清進行抗體檢測，陽性限為說明規(guī)定的陰性對照吸光值(450nm)+0.40。
1.4 組織學
胃活檢組織病理切片常規(guī)HE染色鏡檢，計量觀察組織學病變情況：(1)炎癥程度：以上皮內出現淋巴細胞或漿細胞浸潤為特征，(+)為表淺少量;(+++)為十分密集并深入黏膜深部;(++)時細胞浸潤程度介于(+)與(+++)之間。(2)炎癥活動度：以粒細胞出現為特征，(+)散在間質，(++)伴上皮內浸潤，(+++)密集或形成腺隱窩膿腫，1個(+)計為1分，進行定量分析。
1.5 統(tǒng)計學方法
計算Cag A陽性菌株比率，并探討該類菌株與不同胃疾病的相關關系。
2 結果
2.1 Hp陽性率與Cag A陽性比例
114例就診者中Hp陽性數為54例，陽性率為 47.4%，54例Hp陽性者中Cag A陽性25例，陽性率 46.3%。
2.2 Hp感染及Cag A陽性株胃鏡下病變的關系
見表1。表1 不同病變的Hp感染及Cag A陽性情況 例(略)注：*P<0.01，△P<0.05
2.3 Cag A陽性情況與胃黏膜組織學病變的關系
Cag A與胃黏膜炎癥積分關系的定量分析見表 2，Hp陽性者與胃黏膜癌前病變關系見表3。表2 Cag A與胃黏膜炎癥積分(均值)的關系(略) 表3 Hp陽性者Cag A狀態(tài)與胃黏膜癌前病變的關系 (略)
3 討論
Hp的毒素是近來備受關注的致病因子，主要包括兩種，一種是分子量為90kD的空泡樣變毒素，另一種是分子量約120～140kD的Cag A，后者也是Hp分型中的一個重要指標。Cag A陽性菌的致病作用較陰性者強[1,2]。有很多學者發(fā)現Cag A與消化性潰瘍關系密切[2]。Weel[3]等發(fā)現消化性潰瘍患者胃內的Hp菌 Cag A陽性達93.4%，而NUD患者只有64.6%。我們的結果發(fā)現本組病人Cag A陽性Hp菌的比例只有46.3%，較國外的60%左右的陽性率[2～5]為低，但在十二指腸潰瘍和胃癌患者的陽性率明顯高于單純胃炎者，再一次證實了該蛋白與Hp致病的正相關關系。
Hp與胃癌的關系也是目前研究的熱點之一，流行病學資料支持兩者相關，但尚缺乏基礎研究的證據，Hp致癌的機制也不清楚。近年的研究提示Cag A可能也是Hp的致癌因子之一。Klaamas等發(fā)現在年齡<50歲的胃癌患者中，血清識別Cag A能力明顯高于對照組，與本組發(fā)現相同。但由于例數不夠多，本組資料未能按年齡進行分段分析。雖然Hp感染致潰瘍和胃癌的機制還不清楚，但該菌在胃黏膜定植引起胃黏膜炎癥肯定是致潰瘍和胃癌的前期步驟。本研究發(fā)現Cag A陽性菌引起胃黏膜炎癥程度和活動度均較陰性菌明顯，且引起的萎縮、腸化和淋巴濾泡形成等較嚴重病變的能力也較強，從而為Cag A陽性菌毒力較強提供了另一個佐證。
【參考文獻】
1 胡伏蓮，周殿元，賈博琦.幽門螺桿菌感染的基礎與臨床.北京：中國科學技術出版社，1997，106.
2 Ching CK，Wong BC，Kwok E，et al. Prevalence of Cag A-bearing Helicobacter pylori strains detected by the anti-CagA assay in paltents with peptic ulcer disease and in controls. Am J Gastroenlerol，1996，9l：949.
3 Weel JFL，Van de Hulst RW,Gerris Y,et al. The interrelation between cytotoxin-associated gene A，Vacuolatinn cytotoxin and Helicobacter pylori-related diseas. J Infect Dis，1996，173：1171.
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5 Peek R Jr,Miller G,Tham K,et al.Detection of Helicokacter pylori gene expresion in humam gastric mucosa.J Clin Microbiol,1995,33:28.
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