實驗一 低倍鏡、高倍鏡

　　1、是低倍鏡還是高倍鏡的視野大，視野明亮?為什么?

　　低倍鏡的視野大，通過的光多，放大的倍數(shù)小;高倍鏡視野小，通過的光少，但放大的倍數(shù)高。

　　2、為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察?

　　如果直接用高倍鏡觀察，往往由于觀察的對象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。

　　3、用轉換器轉過高倍鏡后，轉動粗準焦螺旋行不行?

　　不行。用高倍鏡觀察，只需轉動細準焦螺旋即可。轉動粗準焦螺旋，容易壓壞玻片。

　　4、使用高倍鏡觀察的步驟和要點是什么?

　　答：(1)首先用低倍鏡觀察，找到要觀察的物像，移到視野的中央。

　　(2)轉動轉換器，用高倍鏡觀察，并輕輕轉動細準焦螺旋，直到看清楚材料為止。

　　5、總結：四個比例關系

　　a.鏡頭長度與放大倍數(shù)：物鏡鏡頭越長，放大倍數(shù)越大，而目鏡正好與之相反。

　　b.物鏡頭放大倍數(shù)與玻片距離：倍數(shù)越大(鏡頭長)距離越近。

　　c.放大倍數(shù)與視野亮度：放大倍數(shù)越大，視野越暗。

　　d.放大倍數(shù)與視野范圍：放大倍數(shù)越大，視野范圍越小。

　　實驗二 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

　　一、實驗原理

　　某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應。

　　1、可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。

　　葡萄糖+ Cu ( OH )2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓(磚紅色)+ H 2O，即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

　　2、脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍色。

　　3、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應。)

　　二、實驗材料

　　1、做可溶性還原性糖鑒定實驗，應選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺，易于觀察。)

　　2、做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實驗前一般要浸泡3~4小時(也可用蓖麻種子)。

　　3、做蛋白質(zhì)的鑒定實驗，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。

　　三、實驗注意事項

　　1、可溶性糖的鑒定

　　a.應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時，生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水;

　　b. 切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應，無Cu ( OH ) 2生成。

　　2、蛋白質(zhì)的鑒定

　　a. A液和B液也要分開配制，儲存。鑒定時先加A液后加B液;先加NaOH溶液，為Cu2+與蛋白質(zhì)反應提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入，會導致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。

　　b、CuSO4溶液不能多加;否則CuSO4的藍色會遮蓋反應的真實顏色。

　　c. 蛋清要先稀釋;如果稀釋不夠，在實驗中蛋清粘在試管壁，與雙縮脲試劑反應后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應不容易徹底，并且試管也不易洗干凈。

　　3、斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別：

　　實驗三：觀察DNA、RNA在細胞中的分布

　　實驗原理：

　　1.甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色，可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。

　　2.鹽酸能夠改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色體中的DNA和蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結合。

　　實驗四：體驗制備細胞膜的方法

　　實驗材料：人和其他哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和眾多的細胞器，用這樣的紅細胞做實驗材料就只有細胞膜一種膜結構。

　　實驗五：用高倍顯微鏡觀察線粒體和葉綠體

　　一、實驗原理

　　1.葉綠體的辨認依據(jù)：葉綠體是綠色的，呈扁平的橢圓球形或球形。

　　2.線粒體辨認依據(jù)：線粒體的形態(tài)多樣，有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。

　　3.健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料，可以使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色

　　二、實驗材料

　　觀察葉綠體時選用：蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是：葉子薄而小，葉綠體清楚，可取整個小葉直接制片，所以作為實驗的首選材料。

　　若用菠菜葉作實驗材料，要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細胞不含葉綠體。

　　三、討論

　　1、細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體，是不是靜止不動的?為什么?

　　答：不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動，這種運動能隨時改變橢球體的方向，使葉綠體既能接受較多光照，又不至于被強光灼傷。

　　2、葉綠體的形態(tài)和分布，與葉綠體的功能有什么關系?

　　答：葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細胞中的葉綠體比下面的多，這可以接受更多的光照。

　　實驗六 觀察植物細胞的吸水和失水

　　一、實驗原理：

　　1.質(zhì)壁分離的原理：當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而失水，細胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到溶液中，使細胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時，原生質(zhì)層就會與細胞壁分離。

　　2.質(zhì)壁分離復原的原理：當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而吸水，外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細胞液中，整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài)，緊貼細胞壁，使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。

　　二、實驗材料和方法：

　　紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色，易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對細胞無毒害作用。

　　質(zhì)壁分離的方法(引流法)：制作洋蔥鱗片葉外表皮的臨時裝片。然后，從蓋玻片的一側滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在蓋玻片的另一側用吸水紙吸引。這樣重復幾次即可。

　　質(zhì)壁分離復原的方法：改用清水實驗。

　　三、討論

　　1.如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?答：表皮細胞維持原狀，因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。

　　2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離?為什么?

　　答：不會。因為紅細胞不具細胞壁。

　　實驗七 比較過氧化氫在不同條件下的分解

　　一、實驗原理

　　鮮肝提取液中含有過氧化氫酶，過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經(jīng)計算，質(zhì)量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分數(shù)為20%的肝臟研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù)，大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。

　　二、實驗注意事項

　　1.不讓H2O2接觸皮膚，H2O2有一定的腐蝕性

　　2. 不可用同一支滴管，由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶，會影響實驗準確性

　　3.肝臟研磨液必須是新鮮的，因為過氧化氫酶是蛋白質(zhì)，放置過久，可受細菌作用而分解，使肝臟組織中酶分子數(shù)減少，活性降低

　　4.肝臟研磨要充分，研磨可破壞肝細胞結構，使細胞內(nèi)的酶釋放出來，增加酶與底物的接觸面積。

　　實驗八 影響酶活性的條件

　　實驗原理：

　　1、淀粉遇碘后，形成紫藍色的復合物。

　　2、淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖，麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。

　　注：市售a-淀粉酶的最適溫度約600C

　　實驗九 探究酵母菌的呼吸方式

　　實驗原理：

　　1、酵母菌是一種單細胞真菌，在有氧和無氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌，因此便于用來研究細胞呼吸的不同方式。方程式(略)

　　2、CO2可使澄清石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。

　　3、橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學反應，在酸性條件下，變成灰綠色。

　　注意事項

　　增加水中氧氣的方法：用橡皮球或氣泵通入空氣，并用NaOH溶液除去空氣中的CO2

　　實驗十 葉綠體色素的提取和分離

　　一、實驗原理與方法

　　1.色素的提取原理：葉綠體中的色素是有機物，不溶于水，易溶于丙酮等有機溶劑中。提取方法：用丙酮、乙醇等能提取色素。

　　2.色素分離的原理：層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。分離方法：紙層析法。用毛細吸管在濾紙條的下端沿鉛筆線劃一條濾液細線，待濾液干后再劃一兩次，然后將濾紙條插入層析液中(濾液細線不能接觸層析液)。分離結果：濾紙條上從上到下出現(xiàn)四條色素帶：橙黃色(最窄，胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(最寬，葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。胡蘿卜素與葉黃素之間距離最大，葉綠素a與葉綠素b之間距離最小。

　　二、實驗注意事項

　　1.加SiO2為了研磨得更充分。

　　2.加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為葉綠素含鎂，可被細胞液中的有機酸產(chǎn)生的氫代替，形成去鎂葉綠素，CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機酸，防止葉綠體被破壞。

　　3.加無水乙醇是因為葉綠體色素易溶于無水乙醇等有機溶劑。

　　三、實驗討論：

　　1.濾紙條上的濾液細線，為什么不能觸及層析液?

　　答：濾紙條上的濾液細線如觸及層析液，濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中，實驗就會失敗。

　　2.提取和分離葉綠體色素的關鍵是什么?

　　答：提取葉綠體色素的關鍵是：①葉片要新鮮、濃綠;②研磨要迅速、充分;③濾液收集后，要及時用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關鍵是：一是濾液細線要細且直，而且要重復劃幾次;二是層析液不能沒及濾液線。

　　實驗十一 環(huán)境因素對光合作用強度的影響

　　實驗原理：

　　1、影響光合作用強度的因素有光照強度，二氧化碳濃度，溫度，水分，礦質(zhì)元素等等， 測光合作用強度可以通過測氧氣生成速率來進行間接的測量。

　　2、利用真空滲入法排出葉片細胞間隙中的空氣。并使其沉入水中，在光合作用過程中，植物吸收二氧化碳并放出氧氣，產(chǎn)生氧氣的多少與光合作用強度密切相關，由于氧氣在水中溶解度很小，因此氧氣會在細胞間隙中積累，從而使下沉的葉片上浮。依據(jù)葉片上浮的情況可推知葉片光合作用強度，可以用葉片上浮所需的平均時間或者一定時間內(nèi)上浮的葉片數(shù)表示光合作用強度的大小。

　　實驗十二 細胞大小與物質(zhì)運輸?shù)年P系

　　一、實驗原理

　　用瓊脂塊模擬細胞。瓊脂塊中含有酚酞，與NaOH相遇，呈紫紅色，可顯示物質(zhì)(NaOH)在瓊脂塊中的擴散速度。方法：用含酚酞的瓊脂塊模擬細胞。2、現(xiàn)象：NaOH和酚酞相遇呈紫紅色。

　　二、結論：瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小;NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。

　　實驗方法總結

　　1、模型方法。

　　模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對認識對象所作的一種簡化的概括性的描述，模型包括物理模型、數(shù)學模型、概念模型等。⑴以事物或圖畫形式直觀地表達認識對象的特征，這種模型就是物理模型，沃森和克里克制作的DNA雙螺旋結構模型，就是物理模型。⑵數(shù)學模型是用來描述一個系統(tǒng)或它的性質(zhì)的數(shù)學形式。如“J”型增長的數(shù)學模型：t年后種群數(shù)量為Nt=N0 t 。建立數(shù)學模型的步驟：①觀察研究對象，提出問題。②提出合理的假設。③根據(jù)實驗數(shù)據(jù)，用適當?shù)臄?shù)學形式對事物的性質(zhì)進行表達。④通過進一步實驗或觀察等，對模型進行檢驗或修正。

　　2、調(diào)查種群密度的方法。

　?、艠臃椒ǎm用于植物。①取樣的原則：隨機取樣。②取樣的方法：五點取樣法和等距取樣法。樣方的大小一般以1m2的正方形為宜。③計算方法：以所有樣方種群密度的平均值作為該種群的種群密度估計值。

　　⑵標志重捕法，適用于活動范圍大的動物。另外，活動范圍小的動物(如作物植株上的蚜蟲、跳蝻)可用樣方法;土壤小動物可用捕捉器取樣法;趨光性昆蟲可用燈光誘捕法。

　?、浅闃訖z測法，適用于微生物(如酵母菌)。

　　3、同位素標記法。

　　放射性同位素可用于追蹤物質(zhì)的運行和變化規(guī)律。通過追蹤放射性同位素標記的化合物，可以弄清化學反應的詳細過程。這種方法叫做同位素標記法。此方法用于：⑴探究分泌蛋白的合成和運輸途徑：核糖體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 高爾基體 細胞外。⑵證明光合作用釋放的氧氣來自水。⑶噬菌體侵染細菌的實驗。⑷DNA半保留復制實驗。

　　4、孟德爾的實驗方法(成功原因)：⑴正確地選用實驗材料;⑵先研究一對相對性狀的的遺傳，再研究兩對或多對性狀的遺傳;⑶應用統(tǒng)計學方法對實驗結果進行分析;⑷假說—演繹法：先提出問題，然后提出解釋問題的假說，根據(jù)假說進行演繹推理，再通過實驗檢驗演繹推理的結論。如果實驗結果與預期結論相符，就證明假說是正確的。

　　5、類比推理法。薩頓根據(jù)類比推理提出了基因位于染色體上的假說。

　　6、排除法。達爾文運用排除法研究植物表現(xiàn)向光性的原因。

　　7、人工異花傳粉的方法：①去雄，套袋。②傳粉，套袋

　　實驗十三 觀察細胞的有絲分裂

　　一、實驗原理：

　　1.在高等植物體內(nèi)，有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細胞。由于各個細胞的分裂是獨立進行的，因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。

　　2.染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色，通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài)，就可判斷這些細胞處于有絲分裂的哪個時期，進而認識有絲分裂的完整過程。

　　二、觀察細胞有絲分裂的實驗過程

　　三、討論

　　制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么?

　　答：制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵有以下幾點：

　　(1)剪取洋蔥根尖材料時，應該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂最活躍的時間;

　　(2)解離時，要將根尖細胞殺死，細胞間質(zhì)被溶解，使細胞容易分離;

　　(3)壓片時，用力的大小要適當，要使根尖被壓平，細胞分散開

　　實驗十四 低溫誘導染色體加倍

　　一、實驗原理與步驟：

　　原理：用低溫處理植物分生組織細胞，能抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細胞也不能分裂成兩個子細胞，于是，植物細胞的染色體數(shù)發(fā)生變化。

　　步驟：⑴低溫誘導。⑵卡諾氏液中浸泡以固定細胞的形態(tài)，再用95%的酒精沖洗2次。⑶制作裝片(解離、漂洗、染色、制片)。⑷顯微鏡觀察。

　　二、課后討論題答案：

　　低溫誘導和秋水仙素處理都是通過抑制分裂細胞內(nèi)紡錘體的形成，使染色體不能移向細胞兩極，而引起細胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍?？ㄖZ氏固定液(Carnoy's Fluid) 適用于一般植物組織和細胞的固定,常用于根尖,花藥壓片及子房石蠟切片等.有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花藥則需1h左右,此液固定最多不超過24h,固定后用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;如果材料不馬上用,需轉入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透細胞，將其固定并維持染色體結構的完整性，還要能夠增強染色體的嗜堿性，達到優(yōu)良染色效果。

　　配方：無水酒精3份、冰醋酸1份、或無水乙醇6份，氯仿3份，冰醋酸1份。

　　實驗十五 調(diào)查常見的人類遺傳病

　　一、實驗原理與步驟：

　　原理：顯性遺傳病具有世代相傳的特點，隱性遺傳病隔代出現(xiàn)。伴X染色體隱性遺傳病的遺傳特點是交叉遺傳，隔代出現(xiàn)，患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺傳病的遺傳特點是世代相傳，患者女性多于男性。

　　步驟：①確定要調(diào)查的遺傳病，掌握其癥狀及表現(xiàn) ②設計記錄表格及調(diào)查要點③分多個小組調(diào)查，獲得足夠大的群體調(diào)查數(shù)據(jù)④匯總結果，統(tǒng)計分析

　　二、注意事項：

　　1、調(diào)查時，最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病，如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等

　　2、為保證調(diào)查的群體足夠大，小組調(diào)查的數(shù)據(jù)，應在班級和年級中進行匯總

　　某遺傳病的發(fā)病率=某種遺傳病的患病人數(shù)/某種遺傳病的被調(diào)查人數(shù)

　　實驗十六 探究生長素類似物促進插條生根的最適濃度

　　一、實驗原理：

　　植物插條經(jīng)生長素類似物處理后，對植物插條的生根情況有很大的影響，而且用不同濃度、不同時間處理其影響程度亦不同。其影響存在一個最適濃度，在此濃度下植物插條的生根數(shù)量最多，生長最快。

　　二、實驗注意事項

　　1. 選擇插條：以1年生苗木為最好(1年或2年生枝條形成層細胞分裂能力強、發(fā)育快、易成活)

　　2. 處理插條：枝條的形態(tài)學上端為平面，下端要削成斜面，這樣在扦插后可增加吸收水分的面積，促進成活。

　　3. 處理方法：

　　1)浸泡法：把插條的基部浸泡在配制好的溶液中，深約3cm，處理幾小時至一天。(要求的溶液濃度較低，并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地方進行處理)

　　2)沾蘸法：把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s)，深約1.5cm即可。

　　實驗十七 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化

　　一、實驗原理：

　　1.在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個封閉容器內(nèi)的酵母菌種群，通過細胞計數(shù)可以測定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數(shù)量變化。

　　2.養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素。

　　二、酵母菌計數(shù)方法：抽樣檢測法或顯微計數(shù)法(用血球計數(shù)板)。

　　先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入。多余培養(yǎng)液用濾紙吸去。稍待片刻，待細菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。

　　注意：從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾次。

　　實驗十八 土壤中動物類群豐富度的研究

　　一、實驗原理：

　　1.土壤不僅為植物提供水分和礦質(zhì)元素，也是一些動物的良好棲息場所。研究土壤中動物類群的豐富度，操作簡便，有助于理解群落的基本特征與結構。

　　2.許多土壤動物有較強的活動能力，而且身體微小，因此不能用樣方法或標志重捕法進行調(diào)查。在進行這類研究時，常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查，即：用一定規(guī)格的捕捉器(如采集缺罐、吸蟲器等進行取樣)。

　　二、豐富度的統(tǒng)計方法：記名計算法和目測估計法。

　　記名計算法是指在一定面積的樣地中，直接數(shù)出各種群的個體數(shù)目，這一般用于個體較大，種群數(shù)量有限的群落。

　　目測估計法是按預先確定的多度等級來估計單位面積上個體數(shù)量的多少。等級的劃分和表示方法有：“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。